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论文摘要：在梳理近年国内外降脂中药研宛成果的基础上，分别从降脂中药体外筛选模型、有效单体、复方争单味降脂中药以及降脂中成药等几个方面详细阐述降脂中药调控肝LDL－R基因表达的研究现状，使中药药理的作用靶点、作用环节及作用机理更加清楚，促进中药新药研究及临床疗效的提高和中医药理论的创新。
近年来，随着分子生物学、药理学的发展，从分子、基因水平阐明中草药调脂机制，已成为中外医家研究的重点。针对脂质代谢关键环节——肝低密度脂蛋白受体(Lowdensity lipopmtein－receptor LDL－R)基因为切入点，以中药单体、单味中药、复方汤剂通过提高肝LDL－R基因表达治疗脂质代谢紊乱取得较大进展，现仅就国内外相关研究综述如下。
1 肝LDL－R对脂质代谢的调控机制
LDL－R于1973年由美国Goidstein和Brown博士发现，LDL－R基因位于人类第19号染色体短臂末端(p13.1－p13.3)，全长45kb，是编码860个氨基酸的受体前体蛋白，由18个外显子和17个内含子组成。LDL－R具有两种功能：为细胞提供胆固醇和从血液中除去富含胆固醇的脂蛋白颗粒以防止脂质在血液循环中积聚。在分子水平对LDL－R基因表达和转录水平的调控主要有3个机制：转录水平LDL－R基因启动子的激活和抑制、固醇类分子的负反馈抑制以及转录后mRNA分子稳定性的提高与降低。当细胞处于高胆固醇负荷时，可下行抑制LDL－R基因的转录，使其表达下降，LDL－R数目减少，反之亦然。进一步研究发现这一机制与LOL－R基因启动子5－区域存在的固醇调节元件结合蛋白的合成及其与LDL－R基因启动子固醇调节元件(SRE－1)的结合有关。当细胞固醇缺乏时，SRE－I作为一个条件性增强子促进LDL-B基因表达。相反则抑制LDL－R基因表达，这一精巧的固醇反馈抑制性调控机制，使细胞能够保持胆固醇的精巧平衡，又保证细胞有足够胆固醇的可利用，又不致堆积过多造成危害。
胆固醇经LDL－R受体途径输入细胞的量取决于低密度脂蛋白(LOW density lipoprotein LDL)占据受体的数目，而细胞表面受体的数目则随细胞对胆固醇的需求和细胞活动的微环境而变动。长期的高脂肪和高胆固醇饮食会引起总胆固醇(Total cholesterol TC)和低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein－cholesterol LDL－C)升高。减弱肝细胞膜流动性，影响脂蛋白受体活性，干扰LDL与肝细胞膜上LDL－R的结合，致细胞内TC增多，LDL－R合成减少，肝细胞摄取、转变及排泄LDL－C减少，致使血中TC、TG水平升高，尤其是LDL水平升高，增加高脂血症、脂肪肝的危险性。
2 中药复方汤剂对肝LDL－R基因表达调控机制的研究
中药复方汤剂主要通过多部位、多靶点增强肝脏LDL－R基因表达，促进LDL－R蛋白合成，增加肝细胞表面的LDL－R受体数量与活性，综合调节和纠正脂质代谢。金华等，应用调肝导浊中药观察体外培养肝细胞膜LDL－R－mRNA表达水平，发现肝细胞膜LDL受体增加，不仅超过未用药的高脂血清培养组，而且高于正常组，提示调肝导浊中药可直接作用于肝细胞LDL受体基因或影响基因某个环节而使转录增加，提高肝细胞LDL受体的活性而降血脂；韩峰等，采用百草降脂灵研究动脉粥样硬化兔模型LDL－R－mRNA的表达情况，发现百草降脂灵可以直接激活LDL－R基因的表达；李文彪等，研究发现大鼠高脂饮食后肝细胞LDL－R基因表达水平普遍下降，肝细胞LDL－R基因的特异性扩增条带较弱，应用清源调脂胶囊后高脂喂养组大鼠肝细胞LDL－R基因的表达与未用药组相比。
LDL－R基因的表达水平有所升高，与仅用高脂喂养组大鼠相比有显著性差异，提示清源调脂胶囊可改善和诱发高脂血症大鼠LDL－R基因的表达，并能有效提高LDL－R基因表达水平；叶勇等，用化痰活血方研究高脂血症大鼠模型，显示化痰活血方可增加肝脏LDL－R基因的表达，继而促进LDL－R蛋白合成，增加肝表面的LDL－R数量与活性，增强肝脏对脂质等代谢功能，从而保证有较多的LDL－R与LDL－c结合，加快血中LDL的清除和脂蛋白分解，调控血脂的代谢。
中药复方汤剂还能有效的解除高血脂对LDL－R转录的抑制，继而增加肝脏LDL－R基因表达而纠正脂质代谢的紊乱。关建红等，研究调脂续命饮时发现，该药能通过促进体内胆固醇从肠道和皮肤途径排泄，减轻肝细胞的胆固醇负荷，解除其对LDL－R基因转录的下行抑制，使LDL－R受体摄取低密度脂蛋白作用增强。唐可欣等，研究发现胸痹通胶囊能够解除高血脂对LDL－R转录的抑制，通过多条途径发挥增加肝脏LDL－R基因表达作用，继而增加LDL－R的活性，加快血中LDL－C的清除，使血中VLDL、LDL水平降低而防治高脂血症，此机理与中药血脂康胶囊的作用相近似；周俊琴等，发现芪丹煎通过解除高TG、TC的抑制作用，反馈性地增加肝LDL－R的合成，达到上调肝LDL－R基因转录和活性，减轻有害脂质对动脉内皮细胞的毒性，减少脂质在动脉壁沉积和减缓脂质对平肌细胞增殖的促进作用，延缓和阻止动脉粥样斑块的形成和发展。刘桂芳等，在研究理脾调脂胶囊调节LDL－R基因表达时发现，理脾舒肝法能显著解除高血脂对LDL－R基因表达的抑制，使LDL－R的活性增强，清除更多的LDL－c，进一步促进LDL－R基因表达，加速脂蛋白的分解，使脂蛋白的代谢进入良性循环。
中药复方汤剂可以直接影响肝LDL－R基因表达的某个环节，促使其转录和活性增加，达到纠正脂质代谢紊乱的目的。邓慧君等，发现茶多酚可通过LDL受体影响LDL细胞内吞和生成来调节血清LDL，从而调节脂质与脂蛋白代谢紊乱；陈学惠等，研究发现降脂胶囊直接作用于肝LDL－R基因促使其转录增加，提高LDL－R基因表达，降低血浆低密度脂蛋白的浓度；关建红等，利用斑点杂交法观察降脂宁对高脂血症大鼠肝LDL－R基因的表达，发现给降脂宁和相关药物后，其肝细胞LDL－R基因表达水平明显提高，而无给药的高胆固醇大鼠肝LDL－R基因表达水平与正常组相比明显降低，这说明降脂宁的降脂作用可能与肝细胞LDL－R基因表达水平提高有关；冯前进等，研究发现杞蓉益精颗粒通过修饰与LDL－R－mRNA合成相偶联的氧化磷酸化代谢状态而上调肝细胞LDL－R基因表达。刘萍等，发现中药复方制剂冠心康不但促进LDL－R基因转录，还可提高受体的活性，使受体摄取血中低密 度脂蛋白作用增强，促进其代谢、排泄，同时发现冠心康还可升高高脂血症患者外周血淋巴细胞LDLR—mRNA水－平；李志华等，发现芪丹煎提高LDL－R受体的含量与下列因素有关：在细胞水平，药物通过抑制胆固醇合成，反馈性地增加细胞LDL－R受体合成；在分子水平，药物引发HMG－CoA还原酶基因和LDL基因的协同调节，从而上调LDL基因转录和受体活性的作用而达到降脂的目的。 [
3 中药单体或单味中药对肝LDL－R基因表达的调控机制
随着降脂中药研究的不断深入，单味中药或中药单体因其调节LDL－R基因表达与降脂机理比较明确，成为降脂新药开发的重点。潘淮宁等，用黄连素提出物——盐酸小檗碱处理肝细胞，发现肝LDL－R基因表达明显增加，且其表达强度与加入的盐酸小檗碱浓度及作用时间呈正相关，这说明盐酸小檗碱能通过增加LDL－R的表达而有效的调节细胞对脂蛋白的摄取和代谢，维持细胞外LDL－C水平的稳定；中国医学科学院医药生物技术研究所蒋建东博士经过多年攻关，从基因序列、细胞、动物实验以及临床治疗等多个层面和角度，对小檗碱降低血中胆固醇和甘油三酯的药理作用、药效和分子机理进行了系统研究，发现小檗碱是在基因转录后水平上，通过作用于3’UTR区域稳定肝LDL－R－mRNA来降低血脂，与目前使用的他汀类降血脂药物的作用机理完全不同，这在理论上为从中药寻找新型降脂药物提供了新的分子靶点和思路。 免费论文下载中心 http://www.hi138.com 单味中药或中药单体通过调节HMG－COA还原酶和LDL－R基因的表达可调节脂质代谢。林秋实等，发现山楂及山楂酮能降低HMG－COA的活性，能抑制内源性胆固醇的合成，同时直接激活LDL－R基因的表达和大鼠肝LDL－R的翻译水平；Yang TT等，报道绿茶及其有效成分——儿茶酚可通过抑制胆固醇合成，活化胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP)，促进LDL－R基因高效转录；姜传仓等，发现丹参的抑制内源性胆固醇合成与对LDL受体具有反锁性正诱导有关，利用斑点印迹杂交技术发现月参素能激活LDL－R基因的表达和诱导LDL－R转录水平的提高；张晓东等，利用红曲的提取物—醇溶性红曲红色素，采用反转录聚合酶链式反应法检测组织中脂蛋白酶mRNA和LDL－R－mBNA的表达，发现醇溶性红曲红色素通过上调肝组织中LPL－mRNA转录和肝组织中LDL－R－mRNA转录而调节血脂水平，这可能是血脂康调节血脂、预防动脉粥样硬化的分子机制之一。
一些单味中药或中药单体也可通过多部位、多靶点增加肝细胞表面的LDL—R受体数量与活性，增强肝脏LDL－R基因表达，纠正脂质代谢紊乱。范春雷等，利用爪蟾卵母细胞建立人类清道夫受体SR－AI基因表达调控系统，发现具有活血化瘀功用的川芎嗪不仅可增强肝脏LDL—R基因表达，也可抑制诱导肝SR－AI表达，且有量效关系，说明川芎嗪是通过多靶点多途经干预调控脂质代谢的；窦晓兵等，证明姜黄提取物——姜黄素不仅通过促进LDL－R表达增加对LDL的吸收，使外周血液中的TC和TG下降，还通过S REBP途径来促进LDL－R的表达，且具有明显的量效关系的；蔡海江等，发现大黄主要含葸醌衍生物调脂作用不仅与其泻下影响肠道对胆固醇吸收有关，还提高高脂血症大鼠肝LDL－R－mRNA基因表达增加，达到治疗高脂血症的目的。
4 降脂中药——肝LDL－R基因表达体外筛选模型的研究
建立一种简便的直接检测人类LDL－R活性的降脂中药筛选细胞模型，作为高效筛选调脂中药的方法和阐明中药的降脂机理的平台，已成为目前加快降脂中药开发的主要研究手段。沃兴德等，利用具有转录、修饰和胞内运输等功能的爪蟾卵母细胞，建立了“爪蟾卵母细胞人低密度脂蛋白受体基因的表达系统”，作为筛选调脂中药的方法，取得较好的效果；窦晓兵等，通过建立“人B淋巴细胞永生化细胞系”的筛选降脂中药的细胞模型，研究不同浓度姜黄素对人类LDL－R在人淋巴细胞中表达的影响，证明姜黄素是一个非常强的LDL－R基表达促进剂，从而明确了姜黄素在细胞和受体水平上的降脂机制；唐建华等，应用“LDL－R/Luo基因报告系统”，对500多种中药提取物进行了筛选，发现泽泻、决明子、薯蓣等提取物与已报道的降胆固醇药理作用结果相符合，还发现决明子主要是通过激活LDL－R转录活性，促进LDL－R的表达而降血脂的。因此，降脂中药—肝LDL－IR基因表达体外筛选模型不仅用于传统中药的筛选，而作为靶向LDL受体转录活性的药物筛选体系，对发现新的降脂中药并阐明其作用机理具有很好的应用前景。
总之，随着医学科学研究的不断深入，通过对脂代谢候选基因的逐一检验，更深入地研究高脂血症的相关因素，脂代谢紊乱的机制不断的阐明，调脂中草药物的开发和利用前景将更加广阔。
