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高效液相色谱仪作为一种高精密分析科学仪器，如果使用过程中操作不当容易导致各种各样的问题，其中最常见的也是关注度较高的问题是峰形异常的问题。之前我们已经讲述过色谱峰前延、色谱峰拖尾等峰形异常问题的原因及解决方法，下面我们将着重讨论另外一种常见的峰形异常问题-色谱峰分叉，即出现双峰或肩峰，如下图所示：
导致色谱峰分叉的因素有很多，我们来了解一下常见的几种情况：
1
保护柱阻塞或被污染
复杂的样品基质容易造成保护柱阻塞或污染，进而产生色谱峰分叉的现象。
解决方法
取下保护柱再进行分析，如有必要可更换保护柱。
2
分析柱阻塞或被污染
色谱柱在开始使用时没问题，而使用一段时间后出现峰分叉的现象，很可能是由于色谱柱阻塞或者被污染引起。
解决方法
如果分析柱阻塞，一般入口被阻塞的可能性较大，建议更换筛板或更换色谱柱；若分析柱被强保留物质污染，根据污染物质的物化性质选择适当的清洗再生措施。
3
色谱柱填料塌陷
色谱柱通常都有其适用的pH、温度范围，例如硅胶基质填料的色谱柱pH耐受范围一般为2-8，推荐使用温度不超过40℃，若使用不当会造成色谱柱填料塌陷，从而导致色谱峰分叉。
解决方法
由于柱填料塌陷引起的色谱峰分叉很难修复，建议更换新的色谱柱。
4
溶剂效应：样品溶剂不溶于流动相
对于反相色谱，若使用100%有机溶剂或100%强溶剂，大体积进样时将使色谱峰过早的洗脱出色谱柱，导致峰变形。
解决方法
改变样品溶剂。如果可能，采取流动相作为样品溶剂。
5
接头连接不正确
如果连接色谱柱时选用的连接头不配套，色谱柱虽能固定住但管线与柱头仍有一定空间，涡流导致峰前延或分叉。
解决方法
更换配套的连接头
6
样品过载
进样量超过柱容量时，尤其在使用小体积色谱柱时，也可能会出现峰分叉的现象。
解决方法
减小进样量
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